Эндоцитоскопия — шаг к улучшению диагностики болезней пищеварительного тракта у детей
Харитонова А.Ю., Шавров А.А, Меркуова А.О., Шалатонин М.П., Столяров В.В.
Ключевые слова: эндоцитоскопия, дети, оптическая биопсия, эозинофильный эзофагит, пищевод Барретта, целиакия, язвенный колит, болезнь Крона, полипы.
Введение
В современных проспективных исследованиях показатели заболеваемости в педиатрии стали выше, чем публиковалось ранее, что является следствием более широкой доступности и улучшения качества оценки эндоскопических методов диагностики у детей. Уточнение показаний к эндоскопии пищеварительного тракта у детей отразилось на диагностике таких заболеваний как целиакия [1,2,3], рефлюксная болезнь пищевода [ 4,5,6], эозинофильный эзофагит (ЭоЭ) [7,8,9], воспалительные заболевания кишечника (ВЗК) [10] и многих других. Обновленные общепризнанные рекомендации по диагностике и лечению этих заболеваний демонстрируют ключевую роль эндоскопических методов исследования пищеварительного тракта (ПТ) у детей [11,12].
Общепризнанные методы эндоскопической диагностики в педиатрической практике опираются на визуальную оценку слизистой оболочки (СО) с последующим морфологическим подтверждением наличия или отсутствия болезни ПТ. Однако у ряда заболеваний «ошибка локализации» при взятии биопсии СО становится основным источником диагностической неопределенности: её воспаление и клеточная инфильтрация могут распределяться мозаично, нередко имеет ограниченные участки, теряющиеся на фоне её воспалительных и регенераторных изменений [13,14,15].
Эндоцитоскопии (ЭЦ) отводится роль мостика между критериями оценки визуальных макроскопических и гистологических изменений СО ПТ. Технология контактной микроскопии после окрашивания витальными красителями или «оптическая биопсия» позволяет дифференцировать ядерную плотность, форму и неоднородность ядер, клеточный состав поверхностных слоев и подсказывает эндоскописту где общепринятая методика взятия биопсии СО будет максимально информативной [13,16,17]. На сегодняшний день разработаны эндоцитоскопические подходы к оценке ядерной атипии СО пищевода, которые демонстрирую высокую диагностическую точность в сопоставлении с критериями гистологической оценки ее биоптатов [13,16]. Показана возможность количественной оценки микровоспаления и прогнозирования течения язвенного колита при использовании шкалы ELECT, что приближает ЭЦ к концепции «оптической биопсии» толстой кишки [18].
В педиатрии опыт применения ЭЦ ограничен: на данный момент мы не нашли ни одного упоминания в отечественной и зарубежной литературе о применении методики у детей. В то же время детальная визуализация СО ПТ у детей открывает возможности ранней диагностики заболеваний и патологических состояний, неинвазивного мониторинга их течения и оценки эффективности лечения. ЭЦ позволяет в режиме реального времени выполнять оптическую биопсию, что имеет важное значение в плане ранней диагностики и своевременного лечения. [14, 17].
Цель работы
Оценить возможности ЭЦ и перспективы таргетного забора биоптатов СО у детей с различными заболеваниями ПТ.
Материалы и методы
В исследование включены 56 детей от 1 года до 18 лет. Средний возраст составил (12,7±4,4). Нозологические формы заболеваний были представлены: зозинофильный эзофагит (ЭоЭ) у 26 пациентов (рис.1), из которых у 1 ребенка он сочетался с герпес-эзофагитом (рис.2); пищевод Барретта наблюдали у 3 детей; рак in situ в пищеводе на фоне ВПЧ-ассоциированного поражения у одного (рис.3), целиакия у 5 (рис.4); полипы разных отделов ПТ у 7 и воспалительные заболевания кишечника (ВЗК) отмечены у 15 больных (рис.5). Всем пациентам под общей анестезией выполнялась эзофагогастродуоденоскопия (ЭГДС), детям с подозрением на ВЗК тотальная колоноскопия с обязательным осмотром терминального отдела подвздошной кишки. Эндоскопический осмотр проводился в белом свете с оценкой структуры и архитектоники СО, дополнительно осматривали её патологические участки в NBI режиме с увеличением. ЭЦ выполняли как этап диагностической эндоскопии с предварительным окрашиванием зоны интереса витальным красителем 1% р-ром метиленового синего в объеме 3−10 мл. Экспозиция составила в среднем 2−4 минуты и последующим таргетным забором СО из участков эндомикроскопии для гистологического исследования.
Результаты
Во время проведения ЭЦ оценивали регулярность расположения клеток, форму, размер и их плотность, размер и форму ядра, ядерно-цитоплазматическое соотношение, наличие клеточной атипии, полиморфнокеточную инфильтрацию, регулярность расположения, форму желез и крипт, расстояние между ними, ямочный рисунок, капиллярную сеть и много другое.
Эндомикроскопически ЭоЭ был представлен как пласт эпителиоцитов с гиперхроматичными и увеличенными ядрами, множественными двудольноядерными выраженно окрашенными клетками соотвествующими эозинофилам (рис.6). 
Рис. 6.
При пищеводе Баррета наблюдали очаги полной и неполной кишечной метаплазии, ворсинки с большим количеством бокаловидных клеток, наличием щеточной каймы. Оценка диспластических изменений и атипии основывалась на классификации и признаках Kumagai 2022 — увеличение клеточной плотности с потерей клеточной структуры, ядерную аномалию, нерегулярный размер, форму, наличие гиперхромазии, митозы (рис.7). 
Рис. 7.
ри целиакии отмечали полиморфизм эндоцитоскопической картины: выявлялись зоны как с максимальной выраженностью атрофии ворсинок, гиперплазией и деформацией крипт, отсутствием щеточной каймы и бокаловидных клеток, так и с хорошо видимыми укороченными ворсинками, увеличением числа лимфоцитов и снижением количества бокаловидных клеток (рис.8). 
Рис. 8.
Пациентов с ВЗК оценивали по валидированной шкале ELECT при которой обращало на себя внимание уменьшение количества крипт на одно поле зрения, их деформация с формированием криптабсцессов, так же выраженная полиморфноклеточную инфильтрация и расширение микрососудистого русла (рис.9).
Рис. 8.
Типичный доброкачественный паттерн без признаков ядерной атипии отмечали у всех детей с эпителиальными образованиями (рис.10), которые после эндоскопического удаления подвергали традиционному гистологическому исследованию. Таргетная биопсия СО из зон эндомикроскопии показала чувствительность ЭЦ в диагностике патологии ПТ у детей — 92%, специфичность — 94,7%.
Рис. 8.
Заключение
ЭЦ представляет собой передовой метод улучшающий эндоскопическую визуализацию посредством получения в реальном времени изображения СО на клеточном уровне. Ключевое преимущество этой технологии заключается в том, что она обеспечивает значительно более высокую информативность и точность диагностики по сравнению с традиционным гистологическим исследованием биоптатов, поскольку позволяет осмотреть всю поверхность патологического очага во время процедуры, в то время как при стандартной биопсии материал берётся лишь из отдельных, ограниченных участков СО ПТ.
Литература
  1. Saeed A, Assiri A, Cheema H (2019) Celiac disease in children. J Nat Sci Med 2(1):23.
  2. Caio G, Volta U, Sapone A, Leffler DA, De Giorgio R, Catassi C et al (2019) Celiac disease: a comprehensive current review. BMCMed 17(1):142.
  3. Chou R, Bougatsos C, Blazina I, Mackey K, Grusing S, SelphS (2017) Screening for celiac disease. JAMA 317(12):1258
  4. Maguire A, Sheahan K. Pathology of oesophagitis. Histopathology 2011, 60, 864−979.
  5. Sheiko MA, Feinstein JA, Capocelli KE, Kramer RE (2015) The сoncordance of endoscopic and histologic findings of 1000 pediatric EGDs. GastrointestEndosc 81(6):1385−1391.
  6. Thakkar K, Chen L, Tessier ME, Gilger MA (2014) Outcomes of children after esophagogastroduodenoscopy for chronic abdominal pain. Clin Gastroenterol Hepatol 12(6):963−969.
  7. Dellon ES, Cotton CC, Gebhart JH, et al. Accuracy of the eosinophilic esophagitis endoscopic reference score in diagnosis and determining response to treatment. Clin Gastroenterol Hepatol 2016, 14, 31−39.
  8. Wechsler JB, Bolton SM, Amsden K, Wershil BK, Hirano I, Kagalwalla AF. Eosinophilic esophagitis reference score accurately identifies disease activity and treatment effects in children. Clin Gastroenterol Hepatol 2018, 16, 1056−1063.
  9. Lucendo AJ, Molina-Infante J, Arias Á, von Arnim U, Bredenoord AJ, Bussmann C, Amil Dias J, Bove M, González-Cervera J, Larsson H, Miehlke S, Papadopoulou A, Rodríguez-Sánchez J, Ravelli A, Ronkainen J, Santander C, Schoepfer AM, Storr MA, Terreehorst I, Straumann A, Attwood SE (2017) Guidelines on eosinophilic esophagitis: evidence-based statements and recommendations for diagnosis and management in children and adults. United European Gastroenterol J 5(3):335−358.
  10. Levine A, et al. ESPGHAN Revised Porto Criteria for the diagnosis of inflammatory bowel disease in children and adolescents. J Pediatr Gastroenterol Nutr 2014, 58, 795−806.
  11. Tringali A, Thomson M, Dumonceau J-M, et al. Pediatric gastrointestinal endoscopy: European Society of Gastrointestinal Endoscopy (ESGE) and European Society for Paediatric Gastroenterology Hepatology and Nutrition (ESPGHAN) Guideline Executive summary. Endoscopy 2017; 49: 83−91;
  12. Caio G, Volta U, Sapone A, Leffler DA, De Giorgio R, Catassi C et al (2019) Celiac disease: a comprehensive current review. BMCMed 17(1):142.
  13. Minami H, Inoue H, Yokoyama A, Ikeda H, Satodate H, Hamatani S, et al. Recent advancement of observing living cells in the esophagus using CM double staining: endocytoscopic atypia classification. Dis Esophagus.2012;25(3):235−241. DOI: 10.1111/j.1442−2050.2011.1 241.x (PubMed)
  14. Lucendo AJ, Molina-Infante J, Arias Á, et al. Guidelines on eosinophilic esophagitis: evidence-based statements and recommendations for diagnosis and management in children and adults. United European Gastroenterol J.2017;5(3):335−358. DOI: 10.1177/2 050 640 616 689 525 (PubMed)
  15. Hida E, Muroi K, Kakushima N, et al. Diagnostic performance of endocytoscopy for esophageal eosinophilia. Digestion. 2023;104(3):202−211. DOI: 10.1159/528 174 (Karger Publishers)
  16. Cho S, Kashida H, Saito Y, et al. In vivo pathological assessment of Barrett’s esophagus and associated neoplasia using endocytoscopy. Gastrointest Endosc. 2007. (Full text). Gastrointestinal Endoscopy — full text(giejournal.org)
  17. Misawa M, Kudo S-E, Takashina Y, et al. Clinical efficacy of endocytoscopy for gastrointestinal endoscopy. Clin Endosc. 2021;54(4):455−463. DOI: 10.5946/ce.2021.165 (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)
  18. Vitali F, Morgenstern N, Eckstein M, Atreya R, Waldner M, Hartmann A, et al. Endocytoscopy for assessing histologic inflammation in ulcerative colitis: development and prospective validation of the ELECT score. Gastrointest Endosc. 2023;97(1):100−111.e1. DOI: 10.1016/j.gie.2022.08.023 (PubMed)
Предыдущая статья
Эндосонография у новорожденных и детей раннего возраста
Теплов В.О., Фомин Д.Е., Петросян Н.Р., Разумовский А.Ю.
Следующая статья
Переоценка диагностической значимости эндоскопии – причина перевыполнения колоноскопии у детей
Шавров (мл.) А.А., Скворцова Т.А., Ибрагимов С.И., Шавров А.А., Харитонова А.Ю., Меркулова А.О., Морозов Д.А., Волынец Г.В., Тертычный А.С.